甲醇燃料的染色,甲醇燃料的染色原理
大家好,今天小編關(guān)注到一個(gè)比較有意思的話題,就是關(guān)于甲醇燃料的染色的問題,于是小編就整理了3個(gè)相關(guān)介紹甲醇燃料的染色的解答,讓我們一起看看吧。
瑞特染色注意事項(xiàng)?
在進(jìn)行瑞特染色前,首先要確保工作環(huán)境清潔無塵,并配戴好防護(hù)眼鏡和手套。
在染色過程中,嚴(yán)格按照化學(xué)品操作規(guī)程操作,避免接觸皮膚和吸入有害氣體。
染色后,要將廢液妥善處理,避免對環(huán)境造成污染。同時(shí),要對設(shè)備進(jìn)行徹底清洗和消毒,以避免影響下次使用。
最后,對于染色過程中可能產(chǎn)生的廢水和廢液,必須遵守相關(guān)的環(huán)保政策,做好排放處理工作。
1)瑞特染料是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍(lán)組成有復(fù)合染料。亞甲藍(lán)為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽,即氯化美藍(lán)。美藍(lán)容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料。市售美藍(lán)中部分已被氧化為天青。伊紅通常為鈉鹽。即伊紅和伊混合后,產(chǎn)生一種憎液性膠體伊紅美藍(lán)中性沉淀,即瑞特染料。
(2)細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用,各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各種不同的色彩,例如血紅蛋白,嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
(3)PH對細(xì)胞染色有影響。細(xì)胞各種成分均不蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增多,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負(fù)電荷增多,易與美藍(lán)或天青結(jié)合,染色偏藍(lán)。因此細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,以致識別困難,甚至造成錯(cuò)誤。
瑞氏染色的步驟是什么?
步驟:
(1)鉛筆作標(biāo)記,將血涂片平放在染色架上,蠟筆劃線可防液體外溢。
(2)血涂片自然干燥后,滴瑞氏染液(A液)數(shù)滴覆蓋血片,染約1min。
(3)滴加稍多體積的緩沖液,用吸耳球?qū)⑵渑c染液吹勻,染約5分鐘。
(4)慢慢搖動玻片,然后用細(xì)的自來水流從玻片的一側(cè)沖去染液(不要先倒去染液再沖水),待血片自然干燥后(或用濾紙吸干),即可鏡檢。
注意:
?。?)血涂片干透后固定,否則細(xì)胞在染色過程中容易脫落。
(2)沖洗時(shí)應(yīng)以流水沖洗,不能先倒掉染液,以防染料沉著在血涂片上。沖洗時(shí)間不能過久,以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然后立即用流水沖洗。
?。?)染色過淡可以復(fù)染,復(fù)染時(shí)應(yīng)先加緩沖液,然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。
?。?)瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR級以上)和甘油組成,Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液(pH6.4~pH6.8)。
0.1結(jié)晶紫染色液怎么配制?
草酸銨結(jié)晶紫染液的配制: 溶液A 溶液B 結(jié)晶紫 2克
95%酒精 20毫升 草酸銨 0.8克
蒸餾水 80毫升 1.將A、B溶液混合,用濾紙過濾后即可使用。
2.結(jié)晶紫滴一滴即可,不需多用,以避免污染桌面及手指。
結(jié)晶紫染色法測定細(xì)胞數(shù)
1.在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細(xì)胞的培養(yǎng)液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3小時(shí),讓細(xì)胞帖壁。
2.用RPMI-1640培養(yǎng)液10倍遞次稀釋TNF標(biāo)準(zhǔn)品,根據(jù)需要3~5倍遞次稀釋待檢樣品,每孔加0.1ml稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品或待檢樣品,每個(gè)稀釋度3個(gè)重復(fù)孔。對照孔6個(gè),3個(gè)陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養(yǎng)液,3個(gè)陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養(yǎng)液。繼續(xù)培養(yǎng)18~24小時(shí)。
3.甩去培養(yǎng)液,用PBS小心洗滌一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細(xì)胞30秒鐘。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml結(jié)晶紫染液,室溫中放置20分鐘。
5.輕輕甩去染色液,用蒸餾水洗滌各孔,將培養(yǎng)板倒置于吸水紙上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室溫中長期保存。
到此,以上就是小編對于甲醇燃料的染色的問題就介紹到這了,希望介紹關(guān)于甲醇燃料的染色的3點(diǎn)解答對大家有用。